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EvaGreen® 基于染料的 qPCR 預(yù)混液 介紹

更新時間:2023-08-24      點擊次數(shù):1206

特征:


  • EvaGreen® Dye – 信號比 SYBR® Green 更好,更安全、更環(huán)保

  • Cheetah™ Hotstart Taq – 在 95°C 下兩分鐘后全激活,以實現(xiàn)快速循環(huán)方案

  • 配備 2 色跟蹤系統(tǒng),有助于發(fā)現(xiàn)移液錯誤,節(jié)省時間、試劑、DNA 樣本和 $$$

  • 可以不使用 ROX 被動染料,使用單獨的 ROX 管,或與 ROX 預(yù)混合(高濃度或低濃度)

我們的Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物是熱啟動 EvaGreen® 基于染料的主混合物,用于實時 PCR 應(yīng)用和 DNA 熔解曲線分析。這些預(yù)混液可代替任何 SYBR® Green 染料基預(yù)混液。 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物含有低濃度的惰性藍(lán)色染料,使您可以輕松看到含有主混合物的孔。

主混合物可不含 ROX 被動染料,帶有單獨的 ROX 管,或與 ROX 預(yù)混合(高濃度或低濃度)。試劑盒配有 2 色跟蹤系統(tǒng),其中包括 DNA 模板緩沖液(一種深藍(lán)色染料),當(dāng)與模板混合時,添加模板后會將反應(yīng)從淺藍(lán)色變?yōu)樯钏{(lán)色(圖 1,左)。 2 色跟蹤系統(tǒng)可以防止移液錯誤,避免浪費時間、試劑和珍貴的 DNA 樣本。

圖 1. 含有淺藍(lán)色染料的 Forget-Me-Not™ EvaGreen® Master Mix(2 色追蹤)在添加含有深藍(lán)色模板緩沖液的模板之前(左)和之后(右)。

圖 2. Forget-Me-Not  EvaGreen® qPCR 主混合物的性能與其他基于染料的 PCR 主混合物一樣好或更好,具有出色的亮度和靈敏度。

EvaGreen® 染料
一種 DNA 結(jié)合染料,具有非常適合 qPCR 和高分辨率 Melting® (HRM) 分析*的功能。 EvaGreen® 染料通過新穎的“按需釋放"機制與 dsDNA 結(jié)合,允許在 qPCR 中使用相對較高的染料濃度,而不會產(chǎn)生 PCR 抑制(Mao, et al. 2007. BMC Biotech. 7, 76-91) 。

EvaGreen® 染料的其安全性非常好。 DNA 結(jié)合染料本質(zhì)上是危險的,因為它們有可能引起突變。考慮到這一點,Biotium 的科學(xué)家設(shè)計了 EvaGreen® 染料,使其無法穿過細(xì)胞膜,從而防止染料與活細(xì)胞中的基因組 DNA 接觸。所有其他商業(yè) PCR 染料只需幾分鐘即可進入細(xì)胞。例如,SYBR® Green I 已被證明比溴化乙錠(一種的誘變劑)具有更大的環(huán)境毒性(Ohta, et al. 2001. Mut. Res. 492, 91-97)。獨立實驗室已證實 EvaGreen 染料不會導(dǎo)致突變、無細(xì)胞毒性,并且對水生生物來說是安全的,可以直接丟棄在排水溝中。

基于 EvaGreen® 的預(yù)混液的另一個好處是,您可以通過凝膠電泳分析 PCR 產(chǎn)物,而無需在上樣緩沖液或凝膠中添加另一種 DNA 結(jié)合染料。主混合物中的 EvaGreen® 染料可充當(dāng) DNA 預(yù)染色劑,允許在電泳后直接觀察 DNA 帶。

Cheetah™ HotStart Taq
Cheetah™ HotStart Taq DNA 聚合酶是 Biotium 專有的化學(xué)修飾熱啟動 DNA 聚合酶。 Cheetah™ Taq 在室溫下全失活,在 95°C 2 分鐘后全激活,使其特別適合快速循環(huán) PCR 方案。

qPCR 預(yù)混液


Forget-Me-Not™ 通用探針 qPCR Master Mix 是一款高性能產(chǎn)品,適用于基于熒光探針的 PCR 應(yīng)用,包括定量和 SNP 基因分型。該試劑盒適用于所有基于熒光探針的技術(shù),包括水解探針(例如 TaqMan® 和雙標(biāo)記 BHQ® 探針)和位移探針(例如分子信標(biāo))。 Forget-Me-Not™ 通用探針 qPCR Master Mix 在單重和多重反應(yīng)中顯示出出色的結(jié)果一致性,具有廣泛的儀器兼容性,并且可用于標(biāo)準(zhǔn)和快速方案。如果您的儀器需要 ROX 參考染料,ROX 還提供單獨的套件。

該套件包括 40X Forget-Me-Not™ 跟蹤緩沖液,其中含有惰性藍(lán)色染料。您可以選擇將跟蹤緩沖液添加到預(yù)混液、DNA 模板中,或者在反應(yīng)中不使用跟蹤緩沖液。在主混合物中添加跟蹤緩沖液可以讓您輕松區(qū)分含有反應(yīng)混合物的孔和空孔。另一方面,將跟蹤緩沖液添加到 DNA 模板樣品中可讓您在設(shè)置 PCR 反應(yīng)時跟蹤已添加模板的反應(yīng)。

圖 3.勿忘我通用探針預(yù)混液對于多重探針 PCR 反應(yīng)效果非常好。


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