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唾液樣本可以以方便、微創(chuàng)、可重復的方式采集。唾液是一種復雜的異質(zhì)生物樣本，如果收集不當可能會導致數(shù)據(jù)錯誤。然而，通過遵循正確的唾液采集和處理程序，可以從這種樣本類型中獲得高質(zhì)量、可重復的數(shù)據(jù)。 收集唾液之前要考慮什么？
唾液中許多分析物的水平不會保持靜態(tài)，濃度可能會因多種影響而發(fā)生變化 (1-5)。個體之間的樣本也可能存在很大差異。根據(jù)感興趣的分析物和研究的性質(zhì)，有幾個因素可能很重要：
收集時間——大多數(shù)激素表現(xiàn)出晝夜節(jié)律的表達，對于某些唾液蛋白來說也是如此。基于皮質(zhì)醇的研究尤其受到晝夜周期中皮質(zhì)醇表達節(jié)律的影響，并且針對皮質(zhì)醇晝夜表達的特定研究是研究設計的核心。我們建議查看文獻中的最新建議或根據(jù)待測試的分析物向專家咨詢具體建議。對于大多數(shù)研究來說，樣本收集應該在特定時間或在一個時間窗口內(nèi)進行，以獲得最有意義的測量。
反應和恢復特征——如果研究涉及干預措施和壓力源，則應定時收集樣本以正確捕獲反應。對于持續(xù)數(shù)月的較長間隔研究或測量壓力反應的實驗室壓力源研究來說，情況確實如此。
吸收裝置可能會收集局部唾液而不是整個唾液，這可能會影響某些分析物的結果。 α-淀粉酶和分泌型 IgA 等蛋白質(zhì)的唾液水平確實根據(jù)口腔位置的不同而有所不同 (6-8)。我們建議將吸收裝置放置在唾液聚集的位置。對于直立坐著的成人或兒童來說，口腔底部（舌頭下方）是理想的位置。對于處于傾斜位置的嬰兒、成人和兒童，我們建議將頭轉向一側，并從“積聚"唾液的臉頰一側收集唾液。當通過被動口水收集唾液時，我們建議讓唾液積聚在舌下，并通過吸管狀收集輔助裝置輕輕地將收集到的口水推入管中。該樣本還將代表從所有唾液腺收集的唾液，并消除從特定唾液腺收集唾液的任何偏差。
一些親水性分析物（例如 DHEA-S 和/或較大蛋白質(zhì)（例如 SIgA））的水平隨著唾液流速的增加而降低，并且唾液 α-淀粉酶也可能受到類似影響 (9, 10)。目前，我們建議研究人員共同改變 α-淀粉酶、SIgA 和 DHEA-S 等分析物的分泌速率 (mL/min)。
記錄收集所需唾液量所需的總時間，以便測定結果可以乘以流速（mL/分鐘），以便將結果表示為分泌率（每單位時間的輸出）。
示例 (SIgA)：205.60 µg/mL x 1.33 mL/min = 273.45 µg/min
要確定使用吸收裝置收集唾液時的流速，請在收集前后對拭子和儲存管一起稱重。 （唾液密度可假定為 1.0 g/mL 的近似值。）同時記錄拭子在口腔中的時間長度，以便可以估計流速。
現(xiàn)代免疫測定設計為使用小樣本量（小于 100 µL），并且在大多數(shù)情況下，不需要刺激劑來收集足夠的樣本量。我們建議在收集唾液樣本時不要使用口腔刺激劑，因為可能會導致測定干擾或某些分析物水平的改變 (11)；目標應該是盡量減少唾液測試結果中不必要的變異來源。例如，即使咀嚼無味的石蠟/蠟也可能影響流量依賴性分析物。
如果刺激劑是絕對必要的（不使用刺激劑就無法收集唾液）；
在整個研究過程中以一致的方式謹慎使用 (12)。
在使用口服刺激劑之前，考慮使用嗅覺或視覺刺激。
在實際收集之前嘗試與研究參與者一起練習，以確保在實際研究收集之前熟悉該方法。
進行試點研究以確保口服刺激劑不會造成測定或分析物干擾 (11)。
在樣品采集之前，請查看分析物采集方案或根據(jù)要執(zhí)行的檢測的數(shù)量和類型
如果您計劃在當前的研究中包括 DNA 分析，正在存檔以供將來某個日期進行 DNA 分析，或者希望對之前存檔的現(xiàn)有樣本進行 DNA 分析
許多分析物在體循環(huán)中的水平高于唾液中的水平，并且在特定條件下血液污染可能是一個問題 (21-24)。我們建議如下：
我們建議如下：
參與者在樣本采集前 45 分鐘內(nèi)不應刷牙 (23)。
樣本采集前 24 小時內(nèi)不應進行牙科工作。
研究參與者應該接受口腔健康問題或損傷的篩查。
明顯被血液污染的唾液樣本應丟棄并重新收集（22）。
從口腔健康問題高風險人群采集的樣本可以使用 Salimetrics 血液污染檢測試劑盒（Salimetrics 項目 1-1302；1-1302-5）進行篩查。
所使用的收集協(xié)議與待測試的分析物兼容至關重要。有些分析物只能用被動滴液收集的樣品進行測試。使用拭子測量這些分析物可能會導致所測量的分析物回收率過高或過低。
并非所有拭子都是一樣的。我們建議使用經(jīng)過驗證可用于測量目標分析物的拭子。一些制造商擁有專門針對皮質(zhì)醇的拭子，并且僅針對皮質(zhì)醇的測量進行了驗證。使用此拭子測量另一種激素（例如睪酮）可能會導致錯誤的結果。使用棉花作為拭子材料已在文獻中被證明是可變結果的來源，如果需要一致的結果且不被生物材料混淆，則不推薦使用棉花。 Salimetrics 已證實，來自棉花采集設備的數(shù)據(jù)通常與 Shirtcliff、EA 等人的論文（2001 年）被廣泛引用的相匹配。然而，基于棉花的方法也會增加變異性，并提供與“真正的被動流口水"值顯著不同的數(shù)據(jù)結果，如下圖所示；
通過 SalivaBio 口腔拭子測量收集的唾液樣本與通過被動流口水獲得的樣本非常接近。 N=10
在樣品采集之前研究并遵循基本分析物穩(wěn)定性和儲存建議至關重要。僅使用高質(zhì)量聚丙烯收集管和小瓶來儲存樣品。聚苯乙烯或其他未經(jīng)驗證的塑料管可能會對分析物的測量值產(chǎn)生不利影響。所有SalivaBio 收集管和小瓶均由優(yōu)質(zhì)聚丙烯制成。
Salimetrics 建議所有樣品在采集后立即冷凍。然而，如果這是不可能的，研究人員應該考慮：
一些不穩(wěn)定的分析物在室溫下會快速變化（即肽和蛋白質(zhì)）
對于某些分析物，例如（脫氫表雄酮、黃體酮、雌二醇），應盡量減少凍融循環(huán)
Salimetrics是一家全球著名的唾液生物學研究領域專業(yè)產(chǎn)品供應商，其在唾液的收集方法、生物學性質(zhì)及其（唾液中各生物組分的含量）定量檢測技術擁有絕對的研發(fā)與產(chǎn)品供應優(yōu)勢。作為唾液生物學研究及診斷試劑盒應用領域的行業(yè)標準，其供應的唾液手機方案及唾液成分的ELISA檢測試劑盒均專門唾液的理化性質(zhì)所設計，可確保客戶在科學研究或臨床診斷中得到穩(wěn)定、準確的唾液生物學信息，并同時具有操作簡便、結果精確可靠、可重復性高、耗時少等諸多優(yōu)點。Salimetrics的唾液檢測實驗室及擁有豐富的唾液生物學研發(fā)經(jīng)驗的專業(yè)團隊可以為廣大客戶提供唾液生物學研究及診斷應用的專業(yè)指導。
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